酶聯(lián)免疫分析儀(通常稱為ELISA儀)是一種用于定量測定樣本中特定抗原或抗體的儀器，廣泛應(yīng)用于醫(yī)學、生物學和科研領(lǐng)域。以下是其測定步驟：
1.準備試劑與樣本：
-根據(jù)實驗需求，準備相應(yīng)的酶標試劑、底物、終止液等。
-收集并處理待測樣本，確保樣本符合實驗要求。
2.設(shè)置實驗參數(shù)：
-打開酶聯(lián)免疫分析儀，進入操作界面。
-根據(jù)實驗要求，設(shè)置波長、測量模式、反應(yīng)時間等參數(shù)。
3.加樣與反應(yīng)：
-在酶標板上按照實驗設(shè)計加入樣本、標準品及酶標試劑。
-將酶標板放入分析儀中，開始反應(yīng)過程。
4.測量與讀數(shù)：
-反應(yīng)結(jié)束后，分析儀會自動測量各孔的光吸收值(OD值)。
-記錄或打印測量結(jié)果，進行數(shù)據(jù)分析。
5.清洗與維護：
-反應(yīng)結(jié)束后，取出酶標板，清洗分析儀的測量部件。
-定期對分析儀進行維護和校準，確保其準確性和穩(wěn)定性。
酶聯(lián)免疫分析儀的優(yōu)點：
1.靈敏度高
-能夠檢測出極濃度的抗原或抗體。這是因為酶標記物的放大作用，一個抗原或抗體分子可以結(jié)合多個酶分子，而一個酶分子又可以催化多個底物分子產(chǎn)生大量的有色產(chǎn)物。例如，在檢測某些微量的蛋白質(zhì)激素(如胰島素)或病毒抗原(如乙肝病毒表面抗原)時，它能夠檢測出每毫升納克甚至皮克級別的物質(zhì)，比一些傳統(tǒng)的檢測方法(如直接凝集試驗)靈敏得多。
2.特異性強
-基于抗原 -抗體反應(yīng)的特異性，它只對特定的抗原或抗體進行檢測。在復(fù)雜的生物樣本(如血液、尿液等)中，能夠準確地識別出目標物質(zhì)，而不受其他物質(zhì)的干擾。例如，在檢測艾滋病病毒抗體時，即使樣本中存在其他多種蛋白質(zhì)和微生物，它也能準確地檢測出抗HIV抗體，為疾病的診斷提供可靠的依據(jù)。
3.準確性好
-儀器采用標準化的操作流程和準確的光學檢測系統(tǒng)。操作過程中，加樣量、反應(yīng)時間、溫度等條件都可以準確控制。而且，通過內(nèi)部的標準曲線和質(zhì)量控制體系，可以對檢測結(jié)果進行校準和驗證。例如，在臨床檢驗實驗室中，它可以對大量樣本進行檢測，并且保證每個樣本的檢測結(jié)果都具有較高的準確性，誤差范圍通?？梢钥刂圃谳^小的范圍內(nèi)，一般相對誤差在10以內(nèi)。
4.可重復(fù)性佳
-對于相同的樣本，在不同的時間或不同的儀器上進行檢測，只要操作條件一致，其結(jié)果具有良好的重復(fù)性。這是因為它的檢測原理和操作流程是相對穩(wěn)定的。例如，在藥物研發(fā)過程中，需要對同一批次的生物樣本進行多次檢測來評估藥物效果，酶聯(lián)免疫分析儀能夠保證每次檢測的結(jié)果基本一致，從而為研究提供可靠的數(shù)據(jù)支持。
5.檢測速度快
-相比一些傳統(tǒng)的生物學檢測方法(如微生物培養(yǎng)法)，酶聯(lián)免疫分析儀可以在較短的時間內(nèi)完成檢測。一般來說，整個ELISA試驗過程(包括加樣、反應(yīng)、洗滌和檢測)可以在幾個小時內(nèi)完成。例如，在急診檢驗中，對于懷疑是心肌梗死患者的心肌損傷標志物(如肌鈣蛋白)的檢測，它可以快速給出結(jié)果，為醫(yī)生的診斷和治療爭取時間。
更新時間：2025-08-25 
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